Внутрилабораторный контроль

Организация внутрилабораторного контроля

Одной из процедур системы обеспечения качества аналитических работ является внутренний контроль качества результатов анализа.

Аттестованную методику (ФЗ "Об обеспечении единства измерений". Гл. 2, Ст. 5), прежде чем начать реализовывать в лаборатории, необходимо внедрить (ГОСТ ИСО/МЭК 17025:2009, п. 5.4.2). При внедрении методики анализа в лаборатории должны быть установлены показатели качества результатов анализа и проведена проверка их соответствия показателям качества методики анализа.

Элементами системы внутреннего контроля являются:

• оперативный контроль процедуры анализа;
• контроль стабильности результатов анализа.

Оперативный контроль процедуры анализа осуществляет исполнитель анализа с целью проверить готовность лаборатории к проведению анализа рабочих проб. Оперативный контроль процедуры анализа может быть организован ответственным за контроль качества результатов анализа.

Оперативный контроль процедуры анализа проводят:

• при появлении факторов, которые могут повлиять на стабильность процесса анализа (смена партии реактивов, использование СИ после ремонта и т.д.);
• при получении двух из трех последовательных результатов анализа рабочих проб на основе числа результатов параллельных определений большего, чем предусмотрено методикой анализа (в соответствии с процедурой, описанной в ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002);
• с каждой серией рабочих проб.

Контрольные процедуры могут быть реализованы:

• с применением образца контроля;
• с применением метода добавок;
• с применением метода разбавления;
• с применением метода добавок совместно с методом разбавления пробы;
• с применением метода варьирования навески;
• с применением контрольной методики анализа.

Оперативный контроль является наиболее простым способом ВЛК, но он не является единственным, необходимо также проводить контроль стабильности результатов анализа. Основное отличие контроля стабильности от оперативного контроля в том, что при реализации оперативного контроля вывод о том, удовлетворительна процедура анализа или нет, делается на основании одной контрольной процедуры. Контроль стабильности проводится в течение контрольного периода времени, с определенной периодичностью.

Наиболее наглядный способ контроля стабильности – с использованием контрольных карт.

В целях обеспечения стабильности результатов анализа одновременно и регулярно строят контрольные карты для контроля показателей повторяемости, внутрилабораторной прецизионности и точности результатов анализа.

Существует два вида контрольных карт:

При выявлении лабораторией несоответствий процедур или результатов ВКК установленным правилам и нормативам, лаборатория проводит анализ и оценку выявленных несоответствий и осуществляет корректирующие мероприятия.

Прослеживаемость движения пробы

Это возможность отследить весь «жизненный цикл» пробы от момента отбора до выдачи результата заказчику.

При этом должна быть возможность посмотреть, кто отбирал пробу, кто проводил анализ, какие растворы были приготовлены для этого анализа и т.д. Для этого каждой пробе должен присваиваться свой идентификационный номер, с которым проба должна проходить через следующие документы: акт отбора проб, журнал регистрации проб, протокол измерений. Все должно быть максимально прозрачно.

Отчетность

Для того чтобы подтвердить выполнение всех требований лаборатория должна предоставить огромное количество отчетов: журналов, протоколов и т.д. (посмотреть и скачать журналы ) Мы решили эту проблему с помощью автоматизации: создали для себя программу ЛИМС "Н-лаб". которая значительно упрощает работу.

Инструкция по внутрилабораторному контролю качества

Инструкция по внутрилабораторному контролю качества

Примечание 1 в этом контексте документ может означать заявления о политике, процедуры, технические условия, калибровочные градуировочные таблицы, схемы, тексто вой материал, плакаты, заметки, памятки, программное обеспечение, чертежи, планы. 4 требования инструкции подлежат соблюдению всеми сотрудниками химкоаналитической лаборатории ооо каргапольский завод нефрасов, задействованных при планировании и проведении контроля качества с момента введения в действие.

В настоящем документе использованы ссылки на следующие нормативные документы внутрилабораторный контроль качества это определенная система мероприятий, которые осуществляются людьми, работающими в лаборатории.

Эти мероприятия направлены на оценку надежности получаемых результатов, которые выдает эта лаборатория, а также на устранения причин неудовлетворительных параметров полученных результатов. Целью внутреннего контроля качества результатов анализа является обеспечение необходимой точности результатов текущего анализа и экспериментальное подтверждение лабораторией своей технической компетентности, чтобы экоаналитический процесс удовлетворял предварительно установле.

В руководстве по качеству должно быть описание правил управления качеством результатов испытаний, в том числе правил планирования и анализа результатов контроля качества испытаний, которыми предусмотрен внутренний контроль качества испытаний. Как показывает практика, проведение внутреннего контроля качества в испытательных лабораториях осуществляется в форме контроля стабильности результатов анализа с использованием контрольных карт шухарта 1, 6. Контроль стабильности результатов испытаний в форме выборочного статистического контроля внутрилабораторной прецизионности и погрешности результатов анализа с учетом рекомендаций рмг 76 5. Внешняя оценка качества контроль сравнимости результатов, полученных в нескольких лабораториях на одном и том же контрольном материале одними и теми же методами или методами, дающими статистически достоверно совпадающие результаты. Измерительные приборы проверяются ведомственными метрологическими органами в соответствии с инструкцией, в которой указываются производимые операции и средства проверки.

Предварительная оценка повторяемости, прецизионности и правильности измерений лабораторного показателя 1 и 2 стадии внутрилабораторного контроля качества выполняется при внедрении в работу лаборатории каждой новой методики.

Механизмы реализации инструкции 1 внедрение инструкции во всех кдл для постоянного осуществления внутрилабораторного контроля качества лабораторных исследований. Реализация инструкции позволит проводить систематический контроль качества по всем видам лабораторных исследований, повысить уровень надежности получаемых результатов, своевременно принимать меры по предупреждению возможных погрешностей на всех этапах лабораторного исследования. В случаях методик, в которых регламентированы виды и периодичность контроля, при составлении графика внутрилабораторного контроля качества измерений, руководствуются этими требованиями.

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в случае обоснованных сомнений в ее качестве, после смены реактивов и поверке приборов, применяемых в методике внутрилабораторный контроль качества обязателен. При реконструкции лиофилизированных форм для уменьшения величины погрешности дозирования необходимо использовать одно и тоже поверенное дозирующее устройство. Для осуществления ежесерийного внутрилабораторного контроля рекомендуется использовать два контрольных материала со значениями определяемых показателей в нормальном и патологических диапазонах соответственно. Система качества описывается в руководстве по качеству лаборатории, которое должно раскрывать, как лаборатория выполняет требования, предъявляемые к персоналу, помещениям, условиям окружающей среды. Контрольным называется однородный материал, результаты исследования которого используются для оценки погрешности выполняемого аналитического измерения. Результаты внутрилабораторного контроля качества должны быть отражены в формах отчетности, которые приведены в приложениях к данному отраслевому стандарту.

Регистрационная форма оценка сходимости результатов измерения приложение 2 к настоящему отраслевому стандарту регистрационная форма результаты установочных серий измерений показателя в контрольных материалах приложение 3 к настоящему отраслевому стандартуподготовка контрольного материала к исследованию проводится в соответствии с инструкцией производителя. Привести нормы точности лабораторных исследований, применяемые в федеральной системе внешней оценки качества клинических лабораторных исследований, в соответствие с приложением 3. При выполнении лабораторных исследований вне лаборатории нелабораторным персоналом планирование качества исследований должно осуществляться руководителем соответствующего клинического. Внутрилабораторный контроль качества обязателен в отношении всех видов количественных исследований, выполняемых в лаборатории, для которых разработаны контрольные материалы. Примечание если для количественного метода контрольные материалы недоступны, рекомендуется использование других способов контроля качества с использованием проб пациентов. Для хранения замороженного контрольного материала при минус 20 с и более низких температурах рекомендуется использовать специальные лабораторные морозильные камеры. Статьей 15 закона 10 установлен государственный надзор за соблюдением аттестованных методик измерений, относящихся к сфере государственного регулирования обеспечения единства измерений. 2 допустимо процедуры организации и алгоритмы проведения внутреннего контроля оформлять отдельной инструкцией с соответствующей ссылкой на нее в руководстве по качеству.

При внедрении методики анализа в лаборатории должны быть установлены показатели качества результатов анализа и проведена проверка их соответствия показателям качества методики анализа. Контроль за функционированием системы внутрилабораторного контроля качества в кдл организаций здравоохранения возлагается на территориальные органы управления здравоохранением, управления здравоохранения облисполкомов и комитет по здравоохранению мингорисполкома. Критерии контроля качестваподготовка контрольного материала к исследованию проводится строго в соответствии с инструкцией производителя и используется так же, как и пробы пациентов. В общем виде имеется программа внутрилабораторного контроля качества в виде таблицы показатель, нд на мви, вид контроля, периодичность и норматив контроля, оформляется каждый год. Проверок на год, где должны быть отражены все элементы смк, оформляется в виде отчета, где указывается цель, программа проведения, выявленные несоответсвия, кд, результативность проведенных кор. Настоящие правила определяют меры по выявлению и устранению недопустимых случайных и систематических погрешностей количественного анализа биоматериалов, называемые системой внутрилабораторного контроля качества и имеющие целью обеспечить соответствие выполняемых в кдл исследований установленным нормам точности.

Результаты исследования компонентов в контрольной сыворотке сравниваются с методзависимыми установленными значениями, указанными в инструкции паспорте производителя контроль правильности.

Несмотря на то, что в инструкции изготовителей обычно содержатся сведения об отсутствии в контрольном материале антигенов вирусных гепатитов и вич, обращаться с ним следует как с потенциально инфекционным. Руководителям органов управления здравоохранением субъектов российской федерации до 1 января 2001 года принять меры для обеспечения разработки в каждой клиникодиагностической лаборатории учреждений здравоохранения руководства по качеству клинических лабораторных исследований в соответствии с типовой моделью приложение 1, раздел 2 по всему пе.

Приложение б рекомендуемое пример применения карт шухарта при проведении внутреннего оперативного контроля повторяемости, промежуточной прецизионности и правильности количественного химического анализа природного газа. Воспроизводимость качество измерения, отражающее близость друг к другу результатов измерений, выполненных в различных условиях в разное время, в разных местах. В инструкции паспорте к аттестованным контрольным материалам указываются установленные значения и, как правило, допустимые диапазоны результатов измерения, определенные производителем. Контрольные материалы с исследованным содержанием используются для контроля правильности и воспроизводимости результатов лабораторного анализа, с неисследованным для контроля воспроизводимости.

Для проведения контроля воспроизводимости можно воспользоваться другими методами метод параллельных проб, метод смешанных проб, случайных проб, по средней арифметической величине нормальных результатов пациентов.

ПРАВИЛА ПРОВЕДЕНИЯ ВНУТРИЛАБОРАТОРНОГО КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА КОЛИЧЕСТВЕННЫХ КЛИНИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

ПРАВИЛА ПРОВЕДЕНИЯ ВНУТРИЛАБОРАТОРНОГО КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА КОЛИЧЕСТВЕННЫХ КЛИНИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Настоящие правила определяют меры по выявлению и устранению недопустимых случайных и систематических погрешностей количественного анализа биоматериалов, называемые системой внутрилабораторного контроля качества и имеющие целью обеспечить соответствие выполняемых в КДЛ исследований установленным нормам точности.

1.1. Термины и определения, используемые в документе.

Точность измерений - качество измерений, отражающее близость их результатов к истинному значению измеряемой величины. Высокая точность измерений соответствует малым погрешностям всех видов, как систематических, так и случайных.

Погрешность измерения - отклонение результата измерения от истинного значения измеряемой величины.

Систематическая погрешность измерения - составляющая погрешности измерения, остающаяся постоянной или закономерно изменяющаяся при повторных измерениях одной и той же величины.

Правильность измерений - качество измерений, отражающее близость к нулю систематических погрешностей в их результатах.

Случайная погрешность измерения - составляющая погрешности измерения, изменяющаяся случайным образом при повторных измерениях одной и той же величины.

Аналитическая серия - совокупность измерений лабораторного показателя выполненных единовременно в одних и тех же условиях без перенастройки и калибровки аналитической системы.

Внутрисерийная воспроизводимость (сходимость измерений) - качество измерений, отражающее близость друг к другу результатов измерений, выполняемых в одной и той же аналитической серии.

Межсерийная воспроизводимость - качество измерений, отражающее близость друг к другу результатов измерений, выполняемых в разных аналитических сериях.

Общая воспроизводимость - качество измерений, отражающее близость друг к другу результатов всех измерений (определяется внутрисерийной и межсерийной воспроизводимостью).

Примечание. Обратным понятию воспроизводимости является понятие вариабельности измерений, являющейся мерой различий их результатов.

Установленное значение - метод-зависимое значение определяемого показателя, указываемое изготовителем контрольного материала в паспорте или инструкции.

1.2. Погрешности измерения.

Воспроизводимость и правильность являются основными показателями качества результата лабораторного исследования, определяющими общую погрешность (точность) результата измерения - разность между результатом измерения определяемого показателя и истинным значением измеряемой величины. Последнее не может быть установлено абсолютно точно, поэтому на практике вместо термина “истинное значение” используется термин “установленное значение”.

В клинической лабораторной диагностике в качестве установленного значения принимают метод-зависимое значение определяемого показателя, приводимое в паспорте (инструкции) к контрольному материалу, разрешенному Минздравом России к использованию в клинико-диагностических лабораториях.

Источниками погрешностей, выявляемых системой внутрилабораторного контроля качества, могут быть внутренние (лабораторные) и внешние факторы. К внешним факторам относятся принцип аналитического метода, качество приборов и реактивов, калибровочных средств. К внутренним - несоблюдение условий, установленных методикой проведения аналитического исследования: времени, температуры, объемов, правил приготовления и хранения реактивов и т.п.

В зависимости от характера влияния на результаты аналитического исследования различают систематические и случайные погрешности, которые выявляются с помощью многократного исследования контрольного материала в аналитических сериях.

Систематическая погрешность характеризует правильность измерений, которая определяется степенью совпадения среднего результата повторных измерений контрольного материала ( ) и установленного значения измеряемой величины. Разность между ними называется величиной систематической погрешности или смещением, сдвигом и может быть выражена в абсолютных или относительных величинах. Систематическая погрешность, выраженная в относительных величинах, или относительная систематическая погрешность рассчитывается в процентах по формуле:

где - среднее значение измерений контрольного материала, УЗ - установленное значение.

Случайная погрешность отражает разброс измерений и проявляется в различии между собой результатов повторных измерений определяемого показателя в одной и той же пробе. Случайные погрешности обуславливаются влиянием большого числа факторов, которые нельзя выделить, учесть по отдельности и полностью устранить. Математически величина случайной погрешности выражается среднеквадратическим отклонением (S) и коэффициентом вариации (CV), которые рассчитываются следующим образом:

- среднеквадратическое отклонение (S):

где - среднее арифметическое значение результатов n измерений (x₁. x₂. x_n ):

где - сумма результатов измерений x₁. x₂. x_n ; n – число измерений;

- коэффициент вариации (CV):

2.1. Контрольные материалы: виды, требования, рекомендации по выбору, правила использования.

Контрольным называется однородный материал, результаты исследования которого используются для оценки погрешности выполняемого аналитического измерения. Как правило, исследование контрольных материалов выполняется на аналитическом этапе лабораторного исследования и, соответственно, позволяет оценить погрешности, возникающие только на этом этапе. Контрольный материал не может быть использован одновременно в качестве калибровочного.

2.1.1. Виды контрольных материалов.

При внутрилабораторном контроле используются контрольные материалы промышленного изготовления, допущенные в установленном порядке к применению на территории России. Вместе с тем, при невозможности приобрести контрольные материалы промышленного изготовления, в лаборатории могут использоваться контрольные материалы, которые готовятся из неиспользованных остатков образцов пациентов - слитые сыворотки, плазма, моча.

Контрольные материалы промышленного производства выпускаются как с исследованными (установленными, аттестованными), так и неисследованными значениями контролируемых параметров. В инструкции (паспорте) к аттестованным контрольным материалам указываются установленные значения и, как правило, допустимые диапазоны результатов измерения, определенные производителем. Контрольные материалы с исследованным содержанием используются для контроля правильности и воспроизводимости результатов лабораторного анализа, с неисследованным - для контроля воспроизводимости.

Для биохимических, иммунохимических и гормональных исследований выпускаются контрольные материалы (контрольные сыворотки) промышленного производства, которые разделяются на универсальные и специальные. Универсальные содержат большое количество компонентов, концентрация или активность которых исследована по широкому спектру методов.

Специальные контрольные сыворотки предназначены для контроля качества определения:

1) наборов показателей, исследуемых с определенной диагностической целью, например для диагностики:

• - анемий;
• - повреждения сердечной мышцы (в частности, содержащие креатинкиназу, лактатдегидрогеназу и их изоферменты);
• - гипертонии;
• - опухолей (маркеры);
• - фертильности;
• - т.н. “педиатрические” - для срочных анализов в неонатологии;

2) отдельных компонентов:

• - С-реактивного белка;
• - ревматоидного фактора;
• - гормонов;
• - этанола;
• - аммиака;
• - газов крови (водные, забуференные растворы);

3) компонентов, определяемых при терапевтическом мониторинге лекарств, в том числе методами тонкослойной и высокоразрешающей жидкостной хроматографии;

4) компонентов, исследуемых методами “сухой” химии на отражательных фотометрах.

В некоторых специальных контрольных материалах в качестве матрикса матрицы используется цельная кровь, например, контрольные материалы для:

• компонентов, исследование которых проводится методами “сухой” химии (в т.ч. определение глюкозы на портативных глюкометрах);
• фракций гемоглобина и гликогемоглобинов;

Контрольные материалы для контроля качества результатов гематологических исследований:

• стабилизированная цельная кровь;
• суспензии для контроля качества подсчета клеток крови: с искусственными частицами или фиксированными клетками (человеческими, животного происхождения);
• гемолизаты;
• фиксированные мазки крови.

Контрольные материалы (плазма крови) для контроля качества коагулологических исследований:

• с нормальным и патологическим содержанием факторов свертывания;
• для контроля свертывающей системы при приеме антикоагулянтов.

Контрольные материалы для контроля качества исследования мочи:

• - водные растворы с известным содержанием веществ (глюкозы, мочевины, альбумина);
• - цельная моча с установленными значениями широкого спектра биохимических компонентов, гормонов и их метаболитов, белков, токсических веществ и металлов;
• - цельная моча для контроля качества методов сухой химии;
• - искусственные растворы, имитирующие мочу с различными добавками контролируемых компонентов;
• - растворы мочи для контроля исследования отдельных компонентов: токсических веществ, металлов, микроальбуминурии;
• - препараты для контроля качества микроскопии осадка мочи.

Контрольные материалы для контроля качества исследований спинномозговой жидкости:

• - стабилизированная спинномозговая жидкость человека.

2.1.2. Рекомендации по выбору и приобретению контрольных материалов.

При выборе контрольных материалов следует обращать внимание на следующие его характеристики:

• - срок годности стабилизированной формы материала,
• - срок годности материала после вскрытия флакона или растворения лиофилизированного содержимого;
• - время растворения (реконструкции) лиофилизированных форм;
• - тип матрикса матрицы контрольного материала (предпочтительнее использование материалов с матриксомцей человеческого происхождения, в отсутствие таковых допускается использование контрольных материалов животного происхождения, за исключением некоторых аналитических методов);
• - значения определяемых показателей должны находиться в клинически значимом диапазоне. Для осуществления ежесерийного внутрилабораторного контроля рекомендуется использовать два контрольных материала со значениями определяемых показателей в нормальном и патологических диапазонах соответственно. При использовании во внутрилабораторном контроле только одного контрольного материала желательно, чтобы эти значения были близки к “границе принятия решения” (граница нормальных и патологических значений).
• - соответствие перечня аналитов в закупаемом контрольном материале аналитам, исследуемым в лаборатории,
• - наличие в паспорте контрольного материала установленных метод-зависимых значений, соответствующих методам, используемым в лаборатории;
• - достаточность количества закупаемого контрольного материала для возможности его использования в течение длительного времени (от 6 месяцев до 3 лет, в зависимости от срока годности контрольного материала).

2.1.3. Использование контрольных материалов.

Перед использованием контрольного материала необходимо тщательно изучить инструкцию (паспорт) к нему. Несмотря на то, что в инструкции изготовителей обычно содержатся сведения об отсутствии в контрольном материале антигенов вирусных гепатитов и ВИЧ, обращаться с ним следует как с потенциально инфекционным. Перед вскрытием флакона необходимо зарегистрировать серию и номер контрольного материала.

Подготовка контрольного материала к исследованию проводится в соответствии с инструкцией производителя. Особое внимание следует обращать на:

• - аккуратное вскрытие флакона, чтобы избежать потерь материала;
• - точное пипетирование растворителя - бидистиллированной или деионизированной воды (для анализа кальция, фосфора, железа, хлоридов);
• - осторожное перемешивание содержимого после того, как флакон закрыт пробкой - так, чтобы омыть частички материала на пробке (не допуская пенообразования);
• - соблюдение времени растворения.

Для уменьшения погрешности пипетирования необходимо при добавлении растворителя использовать одну и ту же стеклянную пипетку (класса А или другую тщательно откалиброванную весовым способом), хорошо отмытую и отвечающую требованиям для анализа кальция, фосфора, железа.

Для экономного использования контрольного материала содержимое флакона после его растворения и перемешивания разливают в пробирки или флаконы с герметичными крышками на объемы, достаточные для поведения контроля исследований в течение одного дня (но не менее 0,5 мл), и замораживают при -20° С и более низких температурах. Материал, из которого изготовлены пробирки или флаконы, не должен при длительном хранении адсорбировать кальций, альбумин и другие компоненты. Допускается только однократное замораживание и оттаивание контрольной сыворотки и только для тех компонентов и методов, для которых оно допустимо. Оттаивание контрольной сыворотки следует проводить при комнатной температуре. Далее работа с ней проводится так же, как с жидкими контрольными материалами. При этом всегда должно соблюдаться правило: контрольные материалы должны исследоваться так же, как обычные пробы пациентов, т.е. в тех же сериях и в тех же условиях.

Результаты исследования компонентов в контрольной сыворотке сравниваются с метод-зависимыми установленными значениями, указанными в инструкции (паспорте) производителя (контроль правильности). При выборе установленного значения учитываются: принцип метода, прибор, а при определении ферментов - температура реакции, буфер, субстрат, активирующие добавки в реактивы (например, наличие или отсутствие пиридоксальфосфата для методов определения аспартат- и аланинаминотрансфераз, N-ацетилцистеина - для креатинкиназы, трансфосфорилирующего буфера для щелочной фосфатазы и др.).

Правила работы с контрольными материалами для гематологических исследований и исследований мочи приводятся в приложениях 2 и 3 приказа МЗ СССР от 23.04.1985 № 545, коагулологических исследований - в методических рекомендациях Минздрава России, утвержденных в 1993 г.

2.2. Порядок проведения внутрилабораторного контроля качества.

Введение и дальнейшее осуществление внутрилабораторного контроля качества для каждой из методик состоят из трех последовательных стадий:

1. Оценка внутрисерийной воспроизводимости методики.
2. Оценка систематической погрешности и общей воспроизводимости методики, построение контрольной контрольных карты.

Проведение оперативного (текущего) контроля качества результатов лабораторных исследований в каждой аналитической серии.

Первая стадия может быть выполнена с использованием пробы пациента или контрольного материала со значением определяемого показателя в нормальном диапазоне.

Для выполнения третьей, основной стадии внутрилабораторного контроля лаборатория должна располагать достаточным количеством одного (допускается) или двух разных (рекомендуется) неаттестованных контрольных материалов, которые используются также и на второй стадии. Помимо этого, Для выполнения второй стадии требуется использование одного (допускается) или двух разных (рекомендуется) разных аттестованных контрольных материалов. Как уже указывалось, при использовании двух контрольных материалов значениями определяемых показателей в них должны соответствовать нормальному и патологическому диапазонам соответственно. При использовании одного контрольного материала желательно, чтобы эти значения были близки к границае между нормальными и патологическими значениями со значениями определяемых показателей в нормальном и патологических диапазонах соответственно, а также двух неаттестованных контрольных материалов, выбранных лабораторией для использования в третьей стадии внутрилабораторного контроля, с аналогичными значениями определяемых показателей..

Примечание. Допускается применение схемы внутрилабораторного контроля качества, рекомендуемого производителем в инструкции к конкретному средству лабораторной диагностики (анализатору, диагностикуму) при условии, что данное средство лабораторной диагностики разрешено к применению Минздравом России. При этом, однако, персоналом лаборатории должна быть найдена возможность оценить аналитические характеристики данной методики аналогично тому, как это устанавливается настоящим документом (см. стадии 1 и 2).

2.2.1. Стадия 1 (вводная): оценка внутрисерийной воспроизводимости методики.

CV₁₀ в таблице 1 Приложения 3), т.е. выполняется неравенство:

Если это неравенство не выполняется, т.е. коэффициент внутрисерийной вариации методики составляет больше половины предельно допустимого значения коэффициента общей аналитической вариации, следует провести работу по снижению внутрисерийной вариации данной методики или избрать другую методику определения данного показателя с лучшей внутрисерийной воспроизводимостью.

Если внутрисерийная вариация методики отвечает установленным нормам, переходят к следующей стадии.

2.2.2. Стадия 2 (вводная): оценка смещения и коэффициента общей аналитической вариации методики, построение контрольной карты.

На данной стадии одновременно решаются две задачи:

• – во-первых, оценивается соответствие величин систематической погрешности (смещения) и коэффициента общей аналитической вариации методики установленным нормам, т.е. окончательно решается вопрос о возможности ее использования для целей лабораторной диагностики, и
• – во-вторых, для каждого из двух (одного) контрольных материалов, предназначенных для использованияи на третьей стадии, создается контрольная карта (диаграмма) – основной инструмент внутрилабораторного контроля качества количественных исследований.

Для решения первой задачи выполняют следующее:

1. В 10 аналитических сериях измеряют значение определяемого показателя, выполняя по 1 измерению в каждой серии одновременно в двух неаттестованных контрольных материалах, выбранных для оперативного (ежесерийного) контроля, и в двух аттестованных контрольных материалах.

2. Указанные 10 серий рекомендуется выполнять по одной в день. При необходимости сократить период их выполнения (например, из-за ограниченного срока годности реактивов, приготовленных из готового набора) допускается проведение по 2-3 серии в день (например, утром, днем, вечером).

3. По 10 результатам, полученным для каждого из двух аттестованных материалов, с использованием формулы 1 рассчитывают соответственно две величины относительного смещения (В₁₀ ).

4. По 10 результатам, полученным для каждого из двух неаттестованных материалов, с использованием формул 2-4 рассчитывают соответственно два значения коэффициента общей аналитической вариации (СV₁₀ ).

5. Проверяют, что полученные значения В₁₀ и СV₁₀ не превышают их предельно допустимыех значениязначений, приведенныхе в таблице 1 Приложения 3 данного документа. Если последнее выполняется, переходят к выполнению следующего шага (пункт 6). В случае превышения одной одним из полученных значений В₁₀ или СV₁₀ соответствующих или обеими величинами В₁₀ и/или СV₁₀ предельно допустимых значений проводят работу по устранению источников повышенных смещения и/или вариации или избирают другую методику определения данного показателя (с более высокими аналитическими характеристиками), после чего выполняют пункты 1-4 заново.

6. Таким же образом, как описано в пункте 1, выполняют измерения в 10 дополнительных аналитических сериях.

7. Для каждого аттестованного материала по 20 результатам, полученным для каждого из двух аттестованных материалов в 20 выполненных сериях, с использованием формулы 1 рассчитывают соответственно две величиныу относительного смещения (В₂₀ ).

8. Для каждого неаттестованного материала по 20 результатам, полученным для каждого из двух неаттестованных материалов в 20 выполненных сериях, с использованием формул 2-4 рассчитывают соответственно два значенияе коэффициента общей аналитической вариации (СV₂₀ ).

Примечание. При использованиинии на стадии 3 для текущего контроля качества аттестованных аттестованных контрольных контрольных материалов материалов и в том числе и для текущего ежесерийного контроля (вместо неаттестованных материалов) значения СV₁₀ (пункт 4) и СV₂₀ (пункт 8) рассчитывают по результатам их их исследований.

9. Проверяют, что полученные значения В₂₀ и СV₂₀ не превышают их предельно допустимые допустимых значениязначений, приведенные приведенных в таблице 1 Приложения 3 данного документа. Если это условие выполняется, делают окончательный вывод о возможности использования рассматриваемой методики для целей лабораторной диагностики и переходят к построению контрольных карт. В случае превышения одним из полученных значений одной или обеими величинами В₂₀ и/или СV₂₀ соответствующих предельно допустимых значений проводят дополнительную работу по устранению источников повышенных смещения и/или вариации или избирают другую методику определения данного показателя (с более высокими аналитическими характеристиками).

Если лаборатория располагает ограниченным количеством аттестованных контрольных материалов, не позволяющим выполнить по 20 измерений в каждом из ограниченным количеством нихаттестованных контрольных материалов, допускается сделать окончательную оценку смещения методики по величинам В₁₀. определеннымпровести только по 10 измеренийям каждого из материалов, выполненным в каждом из них, выполняя эти измерения по одному по одному в каждой второй из 20-ти аналитических серий, и сделать окончательную оценку смещения методики по величинам В₁₀. рассчитанным по результатам таких измерений.

Если лаборатория располагает только одним аттестованным контрольным материалом, допускается также выполнить окончательную оценку смещения методики по величине В₂₀. полученной для единственного аттестованного материала. В исключительных случаях допускается сделать окончательную оценку смещения методики с использованием единственного аттестованного материала по величине В₁₀ .

Для решения второй задачи (построения контрольной карты) выполняют следующее:

Из полученных 20 результатов исследований определяемого показателя для каждого из двух контрольных из двух контрольного материаловматериала, предназначенных предназначенного для текущего ежесерийного контроля, рассчитывают:

среднюю арифметическую величину ,

среднее квадратическое отклонение S,

контрольные пределы: ± 1S, ± 2S и ± 3S.

Если для в ряду результатов, полученных для одного из контрольных материалов, результатов есть значение, выходящее за пределы ± 3S, то его отбрасывают и для этого материала проводят еще одну аналитическую серию, после чего снова подсчитывают значения и S.

Для каждого из материалов с использованием рассчитанных значений строят контрольную карту. Последняя представляет собой график, на оси абсцисс которого откладывают номер аналитической серии (или дату ее выполнения), а на оси ординат - значения определяемого показателя в контрольном материале (рис. 1). Через середину оси ординат проводят линию, соответствующую средней арифметической величине . и параллельно этой линии отмечают линии, соответствующие контрольным пределам:

± 1S - контрольный предел “1 среднее квадратическое отклонение”;

± 2S - контрольный предел “2 средних квадратических отклонения”;

± 3S - контрольный предел “3 средних квадратических отклонения”.

Последовательность процедур при введении внутрилабораторного контроля качества и рассчитываемые при этом показатели приведены в таблице 1.

Последовательность процедур при введении внутрилабораторного
контроля качества (стадии 1 и 2)

2.2.3. Стадия 3 (основная): оперативный (текущий) внутрилабораторный контроль качества.

С использованием построенных контрольных карт осуществляют оперативный (текущий) контроль качества результатов определения исследуемого показателя. С этой целью , который проводится в каждой аналитической сериипроводится по одному измерению в каждом из двух контрольных материалов; или два измерения в одном и том же контрольном материале, если используется единственный материал (в последнем случае на контрольную карту наносят по две точки на серию). При этом образцы контрольных материалов распределяют равномерно среди анализируемых проб пациентов, в каждой серии для каждого из двух материалов выполняют по одному определению распределяют равномерно среди анализируемых проб пациентов.

Оценку результатов исследования контрольных материалов проводят с использованиемпо соответствующим контрольнымх правил (признаков)ам Westgard, получившим название (по имени их автора) "множественных правил Westgard".“вручную” или с помощью специальных компьютерных программ.

Контрольные правила (признаки) для двух контрольных
результатов в каждой аналитической серии

1_2S - если один из результатов анализа контрольных материалов (далее – контрольное измерение) выходит за пределы ( ± 2S), то проверяется последовательно наличие всех нижеследующих признаков, и аналитическая серия признается неудовлетворительной, если присутствует хотя бы один из них:

1_3S - одино из контрольных измеренийрезультатов выходит за пределы ( ± 3S);

2_2S - два последних контрольных измерения результаты анализа обоих материалов в контролируемой серии или результаты для одного и того же материала в двух последних сериях выходят превышают за предел ( +2S) или лежат ниже предела за предел ( - -2S);

R_4S - два контрольных измерениярезультатами в рассматриваемой контролируемой аналитической серии расположены по разные стороны от коридора ± 2S. (не применяется к одному измерению в серии единственного контрольного материала);

4_1S 4_1S - все четыре последних контрольных измерения превышают ( +1S) или лежат ниже предела ( - 1S);результата анализа обоих материалов в двух последних сериях или все четыре результата для одного и того же материала в четырех последних сериях выходят за предел ( +1S) или за предел ( -1S);

- все десять последних контрольных измерений результатов анализа обоих материалов в пяти последних сериях или все десять результатов для одного и того же материала в десяти последних сериях располагаются по одну сторону от линии, соответствующей .

В случае двух контрольных материалов в правилах 2_2S. 4_1S и могут рассматриваться результаты контрольных измерений, полученные как на обоих материалах соответственно в 1, 2 и 5 последних сериях, так и вна одном из двух материалов, полученные соответственно в 2, 4 и 10 последних сериях.

Пример контрольных карт для двух контрольных материалов, на которых представлены серии, являющиеся неудовлетворительными ввиду нарушения разных контрольных правил, приведен на рис. 2. Аналогичный пример контрольной карты в случае использования одного контрольного материала с двумя измерениями в серии представлен на
рис. 3.

Рис. 2. Примеры нарушения контрольных правил в случае двух контрольных материалов

Пул А - контрольный материал с нормальными значениями: = 100, S = 4

Пул Б - контрольный материал с патологическими значениями: = 150, S = 5

Рис. 3. Примеры нарушений контрольных правил в случае двух измерений в серии одного и того же контрольного материала

Пул А – контрольный материал с нормальным значением: = 100, S = 4

При Применении Контрольныех правила должны проверятьсяважна в определенная определенной последовательностьпоследовательности. приведенной Схема последовательного применения контрольных правил приведена на рис. 4. Так, если на контрольной карте обнаружено превышение одного из пределов ± 2S (контрольный признак 1_2S ), то последовательно проверяют наличие контрольных признаков 1_3S. 2_2S. R_4S. 4_1S и, . (их выявление в повседневной работе лаборатории может выполняться “вручную” или с помощью специальных компьютерных программ). Если обнаруживают хотя бы один из указанных признаков, все результаты, полученные в данной аналитической серии, считаются неприемлемыми. Проведение анализа приостанавливаетсяприостанавливают, выявляется выявляют и устраняется устраняют возможная возможные причина причины возникновения повышенных погрешностей. При этом важно иметь ввиду, что появление контрольных признаков 1_3s и R_4s связаносвидетельствует соб увеличениеми случайных ошибок, в то время как признаки 2_2S. 4_1S и 2_2S. 4_1S и указывают- наоб увеличениеи систематической ошибки методики.

После устранения причин появления повышенных погрешностей этого все пробы, проанализированные в этой серии (и пациентов, и контрольные), исследуются повторно. Поскольку перед этим в методику были внесены изменения, связанные с устранением причины возникновения повышенных погрешностей, контрольные результаты серии, признанной неприемлемой, и предшествующих ей серий не должны использоваться при оценке повторной и последующих серий. Так, например, в повторной серии (первой после внесения изменений в методику) могут быть использованы лишь два контрольных результата этой серии, т.е. правила 4_1S и , а также 2_2S в приложении только к одному из двух контрольных материалов к этой серии не применимы.

Примечание. Использование контрольных материалов для отслеживания изменений в аналитических характеристиках методики (в том числе по контрольным картам) предполагает, что свойства используемых материалов при этом остаются неизменными, т.е. материалы достаточно стабильны. В случае промышленно изготовленных материалов их стабильность обеспечивается и проверяется производителем. В случае же самостоятельно приготовленных контрольных материалов, таких, например, как сливная сыворотка крови, реальная стабильность материала не подвергается столь строгому контролю. Это означает, что при использовании таких материалов может проявиться вполне заметный тренд - снижение (редко – повышение) истинного значения определяемого показателя во времени, что в конце концов приведет к выявлению повышенной систематической погрешности методики по правилам 2_2S. 4_1S или . Для того, чтобы в таких случаях определить причину тренда, необходимо провести измерения в аттестованном контрольном материале и убедиться, что систематическая погрешность методики действительно возросла или, наоборот, причина заключается в изменении значения определяемого показателя в контрольном материале.

Пример различных контрольных признаков на контрольной карте приведен на рис. 3. Их выявление в повседневной работе лаборатории может выполняться “вручную” или с помощью специальных компьютерных программ.

Из приведенных выше основных контрольных правил Westgard оптимальными для выявления случайной погрешности являются правила R_4s и 1_3s. а для систематической - 4_1S и . Пример различных контрольных признаков на контрольной карте приведен на рис. 4.

Примечание 1. Если лаборатория не располагает двумя разными неаттестованными контрольными материалами, допускается использование единственного контрольного материала, в том числе собственного приготовления (например, слитые сыворотки). При этом число измерений этого материала на стадии 2 не меняется (выполняется выполняют по одному измерению в серии), а на стадии 3 в каждой серии проводят по два контрольных измерения и, соответственно, наносят на карту по две точки в серии.. Для посерийного контроля применяют те же контрольные правила в следующих формулировках:

1_2S - один из результатов выходит за пределы ( ± 2S),

1_3S - один из результатов выходит за пределы ( ± 3S);

2_2S - оба результата в контролируемой серии или два результата из четырех в двух последних сериях выходят за предел ( +2S) или за предел ( -2S);

R_4S - различие между результатами в контролируемой серии превышает 4S;

4_1S - все четыре результата в двух последних сериях выходят за предел ( +1S) или за предел ( -1S);

- все десять результатов анализа в пяти последних сериях располагаются по одну сторону от линии, соответствующей .

Примечание 2. В случаях, в которых исследования выполняются в коротких аналитических сериях (редко выполняемые исследования,например, исследования в дежурной экспресс-лаборатории и т.п.) и проведение двух контрольных измерений в каждой серии чрезмерно повышает стоимость анализа, допускается делать по одному измерению единственного контрольного материала. В таких случаях в качестве контрольных используют только признаки 1_2s и 4_1S. наличие хотя бы одного из которых свидетельствует о неприемлемости результатов контролируемой серии.

2.2.4. Смена контрольного материала.

Для сохранения непрерывности внутрилабораторного контроля в период, когда используемого контрольного материала остается только на 20 аналитических серий, начинают переход на новый контрольный материал путем проведения так называемого “перекрывания”. Перекрывание состоит в том, что в течение 20 серий (периода перекрывания) лаборатория исследует одновременно заканчивающийся материал (“используемый”), по которому продолжается осуществление текущего контроля, и материал, который должен его заменить (“вводимый”). При этом пробы вводимого контрольного материала располагают в положениях, отстоящих на две или более позиции от положений, в которых расположены пробы используемого контрольного материала. Например, если пробы используемого контрольного материала находятся в положениях 07, 36, то пробы вводимого контрольного материала можно разместить в положениях 4, 33. По результатам, полученным для вводимого контрольного материала, рассчитывают среднее арифметическое значение и среднее квадратическое отклонение, по которым строится новая контрольная карта.

2.2.5. Правила проведения внутрилабораторного контроля качества методом кумулятивных сумм -( cusum)

Данный метод не является обязательным для вводимой системы внутрилабораторного контроля качества и может быть использован как дополнительный для выявления небольших систематических погрешностей одновременно с описанным выше способом контроля качества с помощью контрольных карт. Последовательность процедур в рекомендуемданном варианте метода cusum состоит в следующем:

1. 1. По результатам исследования контрольного материала, предназначенного для текущего оперативного контроля, полученным в первых 20 аналитических сериях, рассчитывают величины и S. на основании которых рассчитывают верхний (К_В = +1S) и нижний (К_Н = -1S) контрольные пределы, а также предельное значение cusum (Н= ± 2,7S).

2. Если результат анализа контрольного материала лежит в пределах ( ± 1S), считают, что метод работает правильно и расчет кумулятивной суммы не производят.

2. В каждой контролируемой аналитической серии рассчитывают разницу (D_i =Х_i - ) между текущим значением, полученным для данного контрольного материала в этой серии (Х_i ), и средним значением для данного материала ( ).

33. Если результат анализа контрольного материала полученная разность D_i выходит за пределы ( ± 1S), начинают расчет кумулятивной суммы в последовательных сериях, суммируя разности (d_i ) между текущим значением Х_i и тем контрольным пределом, который был превышен:

(если превышен верхний предел ( +1S),соответственно, d_i =Х_i --( +S),К_В или

если нижний ( -S), d_i =Х_i -( -SК_Н ). по следующей формуле (n- число аналитических серий):

где n- число аналитических серий.

Если разность D_i лежит в пределах ± 1S, расчет кумулятивной суммы не начинают и считают, что метод работает правильно.

4. Расчет cusum кумулятивной суммы продолжают до тех пор, пока значение cusum его абсолютная величина не превысит предельной величины - предельную величину 2,7S,Н – тогда после чего метод считают «вышедшим из-под контроля», либо до тех пор, пока cusum не поменяет знак – в этом случае расчет cusum приостанавливают, и метод считается считают «вошедшим в контроль».

В таблице 2 представлен пример расчета кумулятивных сумм по описанному алгоритму. Контрольная карта cusum строится либо отдельно (рис. 5), либо параллельно с обычной контрольной картой.

Пример расчета сusum для контрольного правила ± 1S (2,7S)

Установленные значения определяемого показателя вдля контрольномго материале, в котором :

+S =Верхний контрольный предел (К_В ): 105;

Нижний контрольный предел (К_Н ): -S = 95;

Предельное значение сusum (Н): ± 2,7S = 13,5.

+14 выход из контроля

Данный метод контроля не предусматривает обязательное построение контрольной карты. Как правило, достаточно проведение расчета и оценки cusum с помощью таблицы.

Выход метода из-под контроля, выявленный методом cusum, не является основанием для остановки анализа и повторного исследования проб пациентов. Он служит только в качестве предупреждающего сигнала, призванного обратить внимание на наличие систематических погрешностей анализа.

В ряде случаев (при наличии соответствующих компьютерных программ) рекомендуется начинать расчет кумулятивной суммы, если результат анализа контрольного материала выходит за пределы использовать более жесткие пределы К_В и К_Н. равные ± 0,5S, что позволяет выявлять систематические ошибки меньшего размера, чем в приведенном примере. В таком случае метод считают «вышедшим из-под контроля», когдаПредельное значение cusum, позволяющее достоверно выявлять эти погрешности, в данном случае устанавливается равным cusum по абсолютной величине превысит ± 5,1S.

2.3. Правила проведения контроля качества количественных методов лабораторного анализа с использованием проб пациентов.

Данные методы применяются как дополнительные способы контроля качества результатов лабораторных исследований, а как самостоятельные - только в исключительных случаях, например, при отсутствии контрольных материалов.

Рис. 5. Контрольная карта cusum.

2.3.1. Метод контроля правильности по ежедневным средним.

Данный метод применяется для контроля правильности результатов лабораторного анализа и позволяет выявить систематические погрешности не только на аналитическом, но и на преаналитическом этапе. Принцип метода состоит в ежедневном расчете средней арифметической всех результатов определения данного показателя, полученных в лаборатории за день.

Условия, необходимые для внедрения метода:

- число проб пациентов, исследуемых ежедневно обследуемых лабораторией, пациентов должно быть достаточным для статистической достоверности данныхо большим (30 и более, значение этого числа зависит от анализируемого компонента);

- контингент обследуемых лабораторией пациентов должен быть достаточно однородным (по патологии, полу, возрасту);

- число усредняемых результатов должно быть примерно одинаковым. и оно зависит от анализируемого компонента.

Последовательность процедур:

• ежедневно из полученных в течение дня результатов проводится расчет ежедневной средней арифметической величины ( ), и эта процедура повторяется в течение 20 дней;

• далее из 20 ежедневных средних проводится расчет общего среднего _общ и среднего квадратического отклонения (S);
• рассчитываются контрольные пределы ( _{общ ±} 1S, ( _{общ ±} 2S и _{общ ±} 3S) и строится контрольная карта.

После построения контрольной карты в лаборатории ежедневно рассчитывается из всех результатов каждого анализируемого показателя, и полученное значение наносится на контрольную карту в виде точки.

Анализ контрольной карты проводится по описанным выше правилам Westgard. При применении данного метода контроля ввиду большого объема вычислительной работы рекомендуется пользоваться компьютерной обработкой результатов.

2.3.2. Метод контроля воспроизводимости по дубликатам.

Принцип данного метода внутрилабораторного контроля качества состоит в проведении двух параллельномых исследованийи определяемого показателя в выбранной наугад пробе пациента (в дубликатыах), нахождении величины относительного размаха (R_i. %) между первым значением показателя (X₂ ) и вторым (X₂ ) и сравнении ее с установленными контрольными пределами.

- определить уровень определяемого показателя в выбранной наугад пробе пациента дважды в течение одной аналитической серии;

- рассчитать величину относительного размаха между двумя определениями по формуле:

где - разница между результатами определения по абсолютному значению (модуль);

- повторить описанную процедуру в 20 аналитических сериях;

- из полученных 20 значений (R_{1, 2, … ,20} ) рассчитать среднее арифметическое значение :

Далее рассчитывают контрольные пределы, умножая полученное значение на коэффициенты, соответствующие 95% и 99% квантилям распределения размахов:

- для 95%-ной контрольной границы - 2,46;

- для 99%-ной контрольной границы - 3,23.

Исходя из полученных контрольных пределов строится контрольная карта, где на оси абсцисс откладывается нулевая линия (она будет соответствовать нулевому размаху), на которой отмечается номер аналитической серии, а параллельно ей в удобном масштабе проводят линии, соответствующие и контрольным границам 95% и 99% (рис. 6). На оси ординат отмечают уровень определяемого показателя.

Далее, в каждой аналитической серии проводится параллельное исследование определяемого показателя в выбранной наугад пробе пациента. Пробы, предназначенные для параллельного исследования, должны располагаться случайным образом по длине аналитической серии. Полученное значение относительного размаха сравнивается с контрольными границами. Если хоть одно полученное значение выходит за контрольную границу, соответствующую 99% (контрольный признак “1_R99 ”), или, если два последовательных значения выходят за контрольную границу “95%” (контрольный признак “2_R95 ”), то такая аналитическая серия считается непригодной, исследование проводится повторно.

Руководитель Департамента
организации медицинской
помощи населению А.А.Карпеев